テストの概要と説明
マラリアは蚊が媒介する溶血性の発熱性疾患で、年間2億人以上が感染し、100万人以上が死亡しています。これは、熱帯熱マラリア原虫、三日熱マラリア原虫、卵形マラリア原虫、およびマラリア原虫の 4 種のマラリア原虫によって引き起こされます。これらのマラリア原虫はすべてヒトの赤血球に感染して破壊し、悪寒、発熱、貧血、脾腫を引き起こします。熱帯熱マラリア原虫は、他のマラリア原虫種よりも重篤な疾患を引き起こし、マラリアによる死亡のほとんどを占めます。熱帯熱マラリア原虫と三日熱マラリア原虫が最も一般的な病原体ですが、種の分布には地理的にかなりのばらつきがあります。
伝統的に、マラリアは末梢血のギムザ染色された厚い塗抹標本上の微生物の証明によって診断され、さまざまな種類のマラリア原虫は感染した赤血球におけるそれらの出現によって区別されます。この技術は正確で信頼性の高い診断を可能にしますが、熟練した顕微鏡医が定義されたプロトコルを使用して実行した場合にのみ可能であり、世界の僻地や貧困地域にとっては大きな障害となります。
マラリア Pf/Pv Ag 迅速検査は、これらの障害を解決するために開発されました。熱帯熱マラリア原虫ヒスチジンリッチタンパク質 II (pHRP-II) および三日熱マラリア原虫乳酸デヒドロゲナーゼ (Pv-LDH) に特異的な抗体を利用して、熱帯熱マラリア原虫と三日熱マラリア原虫の感染を同時に検出および区別します。試験は、実験器具を使用せずに、訓練を受けていない、または最小限のスキルしか持たない人でも実行できます。
原理
マラリア Pf/Pv Ag 迅速検査は、ラテラル フロー クロマトグラフィー免疫測定法です。ストリップテストコンポーネントは、1) 金コロイドと結合したマウス抗 Pv-LDH 抗体 (Pv-LDH 金結合体) および金コロイドと結合したマウス抗 pHRP-II 抗体 (pHRP-II 金結合体) を含むワインレッド色の結合パッド、2) 2 つのテストバンド (Pv および Pf バンド) とコントロールバンド (C バンド) を含むニトロセルロース膜ストリップで構成されます。Pv バンドは Pv 感染検出用に別のマウス抗 Pv-LDH 特異的抗体でプレコートされ、Pf バンドは Pf 感染検出用のポリクローナル抗 pHRP-II 抗体でプレコートされ、C バンドはヤギ抗マウス IgG でコートされています。
アッセイ中、適切な量の血液検体がテストカセットのサンプルウェル (S) に分注され、溶解バッファーがバッファーウェル (B) に追加されます。バッファーには、赤血球を溶解し、さまざまな抗原を放出する界面活性剤が含まれており、抗原は毛細管現象によってカセットに保持されているストリップ全体を移動します。Pv-LDH が標本中に存在する場合、Pv-LDH-金複合体に結合します。免疫複合体は、プレコートされた抗 Pv-LDH 抗体によって膜上に捕捉され、バーガンディ色の Pv バンドを形成し、Pv 陽性の検査結果が示されます。あるいは、検体中に pHRP-II が存在する場合、pHRP-II-金複合体に結合します。次に、免疫複合体は、プレコートされた抗 pHRP-II 抗体によって膜上に捕捉され、バーガンディ色の Pf バンドを形成し、Pf 陽性検査結果を示します。テストバンドが存在しない場合は、陰性結果が示唆されます。テストには、テスト バンドの発色に関係なく、ヤギ抗マウス IgG / マウス IgG (抗 Pv-LDH および抗 pHRPII) と金の複合体の免疫複合体のワインレッド色のバンドを示す内部コントロール (C バンド) が含まれています。そうでない場合、試験結果は無効となり、試験片を別の装置で再試験する必要があります。
