テストの概要と説明
マラリアは蚊が媒介する溶血性の発熱性疾患で、年間2億人以上が感染し、100万人以上が死亡しています。これは、熱帯熱マラリア原虫、三日熱マラリア原虫、卵形マラリア原虫、およびマラリア原虫の 4 種のマラリア原虫によって引き起こされます。これらのマラリア原虫はすべてヒトの赤血球に感染して破壊し、悪寒、発熱、貧血、脾腫を引き起こします。熱帯熱マラリア原虫は、他のマラリア原虫種よりも重篤な疾患を引き起こし、マラリアによる死亡のほとんどを占めており、最も一般的な 2 つのマラリア病原体の 1 つです。
伝統的に、マラリアは末梢血のギムザ染色された厚い塗抹標本上の微生物の証明によって診断され、さまざまな種類のマラリア原虫は感染した赤血球におけるそれらの出現によって区別されます。この技術は正確で信頼性の高い診断を可能にしますが、熟練した顕微鏡医が定義されたプロトコルを使用して実行した場合にのみ可能であり、世界の僻地や貧困地域にとっては大きな障害となります。
Pf Ag 迅速試験は、これらの障害を解決するために開発されました。ヒト血液検体中の Pf 特異抗原 pHRP-II を検出します。これは、訓練を受けていない、または最小限のスキルしか持たない人でも、実験室の設備を使用せずに実行できます。
原理
Pf Ag 迅速テストは、ラテラル フロー クロマトグラフィー イムノアッセイです。テストストリップのコンポーネントは、1) 金コロイドと結合したモノクローナル抗 pHRP-II 抗体を含むワインレッド色の結合パッド (pHRP II-金結合体)、2) テスト バンド (Pf) とコントロール バンド (C バンド) を含むニトロセルロース メンブレン ストリップで構成されます。Pf バンドはポリクローナル抗 pHRP-II 抗体でプレコーティングされており、C バンドはヤギ抗マウス IgG でプレコーティングされています。
アッセイ中、適切な量の血液検体がテストカセットのサンプルウェル (S) に分注され、溶解バッファーがバッファーウェル (B) に追加されます。バッファーには、赤血球を溶解し、pHRPII 抗原を放出する界面活性剤が含まれており、pHRPII 抗原は毛細管現象によってカセットに保持されたストリップ全体を移動します。pHRP-II が検体中に存在する場合、pHRP II-金複合体に結合します。次いで、免疫複合体は、プレコートされたポリクローナル抗pHRP II抗体によって膜上に捕捉され、ワインレッド色のPfバンドを形成し、Pf陽性検査結果を示します。
Pf バンドの欠如は陰性結果を示唆します。このテストには、Pf バンドの発色に関係なく、ヤギ抗マウス IgG / マウス IgG (pHRP II – 金結合体) の免疫複合体のワインレッド色のバンドを示す内部コントロール (C バンド) が含まれています。そうでない場合、試験結果は無効となり、試験片を別の装置で再試験する必要があります。
