テストの概要と説明
マラリアは蚊が媒介する溶血性の発熱性疾患で、年間2億人以上が感染し、100万人以上が死亡しています。これは、熱帯熱マラリア原虫、三日熱マラリア原虫、卵形マラリア原虫、およびマラリア原虫の 4 種のマラリア原虫によって引き起こされます。これらのマラリア原虫はすべてヒトの赤血球に感染して破壊し、悪寒、発熱、貧血、脾腫を引き起こします。熱帯熱マラリア原虫は、他のマラリア原虫種よりも重篤な疾患を引き起こし、マラリアによる死亡のほとんどを占めます。熱帯熱マラリア原虫と三日熱マラリア原虫が最も一般的な病原体ですが、種の分布には地理的にかなりのばらつきがあります。
伝統的に、マラリアは末梢血のギムザ染色された厚い塗抹標本上の微生物の証明によって診断され、さまざまな種類のマラリア原虫は感染した赤血球における出現によって区別されます1。この技術は正確で信頼性の高い診断を可能にしますが、それは熟練した顕微鏡医が定義されたプロトコルを使用して実行した場合に限られます2。これは世界の僻地や貧困地域にとって大きな障害となります。
マラリア Pf / Pan 抗原迅速検査キットは、これらの障害を解決するために開発されました。この検査では、熱帯熱マラリア原虫特異的タンパク質であるヒスチジンリピートタンパク質 II (pHRP-II) に対する一対のモノクローナル抗体とポリクローナル抗体、および 4 種のマラリア原虫によって産生されるタンパク質であるマラリア原虫乳酸デヒドロゲナーゼ (pLDH) に対する一対のモノクローナル抗体を利用するため、熱帯熱マラリア原虫およびまたは他の 3 つのマラリア原虫の感染の同時検出および鑑別が可能になります。これは、訓練を受けていない、または最小限のスキルしか持たない人でも、実験室の設備を使用せずに実行できます。
原理
Pf/汎マラリア迅速検査キットは、ラテラルフロークロマトグラフィーイムノアッセイです。テストストリップのコンポーネントは以下で構成されます: 1) 金コロイドと結合したマウス抗 pHRP-II 抗体 (pHRP II 金結合体) および金コロイドと結合したマウス抗 pLDH 抗体 (pLDH 金結合体) を含むワインレッド色の結合パッド、
2) 2 つのテスト バンド (Pan および Pv バンド) とコントロール バンド (C バンド) を含むニトロセルロース膜ストリップ。Pan バンドは、4 種のマラリア原虫のいずれかの感染を検出できるモノクローナル抗 pLDH 抗体でプレコートされ、Pf バンドは Pf 感染検出用のポリクローナル抗 pHRP-II 抗体でプレコートされ、C バンドはヤギ抗マウス IgG でコートされています。
アッセイ中、適切な量の血液検体がテストカセットのサンプルウェル (S) に分注され、溶解バッファーがバッファーウェル (B) に追加されます。バッファーには、赤血球を溶解し、さまざまなマラリア原虫抗原を放出する界面活性剤が含まれており、これらの抗原は毛細管現象によってカセットに保持されたストリップ全体を移動します。pHRP-II が検体中に存在する場合、pHRP II-金複合体に結合します。次に、免疫複合体は、プレコートされた抗 pHRPII 抗体によって膜上に捕捉され、ワインレッド色の Pf バンドを形成し、Pf 陽性検査結果を示します。pLDH が検体中に存在する場合、pLDH 金複合体に結合します。次に、免疫複合体は、プレコートされた抗 pLDH 抗体によって膜上に捕捉され、ワインレッド色の Pan バンドを形成し、プラスモジウム陽性の検査結果を示します。パンバンドが存在しない場合は、他の 3 つのマラリア原虫のいずれかについて検査結果が陽性であることが推奨されます。
テストバンド (Pan および Pf) が存在しない場合は、陰性結果が示唆されます。テストには、テスト バンドの発色に関係なく、ヤギ抗マウス IgG / マウス IgG (pHRP-II および pLDH-gold 複合体) の免疫複合体のワインレッド色のバンドを示す内部コントロール (C バンド) が含まれています。そうでない場合、試験結果は無効となり、試験片を別の装置で再試験する必要があります。
